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    医学实验手册:实验动物安死术

    发布时间:2020-05-20 17:08     文章来源:未知     作者:凯发k8国际首页登录

     

    ​医学实验手册

     

    普略医学(凯发k8国际首页登录)成立于2011年,是国内较早成立的转化医学研究技术服务公司。公司拥有八大转化医学研究技术平台,数十个技术实验室全部按国家或国际一流标准建设,仪器配置齐全。普略医学根据多年实验经验推出医学实验手册,助力基础医学科研!上期我们讲了动物血液采集,这一期我们来看看实验动物安死术~~

     

    安死术(euthanasia)是指公众认可的、以人道主义的方法处死实验动物的过程,即达到没有惊恐及焦虑,安静地、无痛苦地死亡。

     

    安死术标准

     

    1、死亡时没有惊恐、疼痛表现。

    2、使动物在最短时间内失去意识迅速死亡。

    3、方法可靠且可重复。

    4、保证操作人员安全。

    5、采取的方法要与研究要求和目的一致。

    6、对观察者和操作者的情绪影响最小。

    7、对环境污染的影响最小。

    8、需要的机械设备简单、价廉、易操作。

    9、处死动物的地点应远离动物房并隔开。
    此外还需注意通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察,对死亡作出综合判断,确认实验动物已经死亡,同时妥善处理好尸体。
     

    安死术常用方法

     

    一、吸入麻醉法
    常用的麻醉剂为乙醚,主要用于大、小鼠等小型啮齿类动物。方法是将浸润乙醚的棉花或纱布放入密闭的容器内,将动物放入,数分钟后动物因吸入过量麻醉剂导致中枢神经过度抑制而死亡。
    优点:不需要静脉注射,操作简便。
    缺点:易燃易爆,具有黏膜刺激性,应配置合适的排气系统;麻醉兴奋期有时会出现动物挣扎的现象;处死豚鼠时,肺和脑会出现小出血点,在病理解剖时应注意。
    二、颈椎脱位法
    主要用于大、小鼠等小型啮齿类动物。其方法是右手抓住鼠尾,将其放在实验台上,用左手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部,右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,造成颈椎脱臼,脊髓与脑干断离,动物立即死亡。
    优点:脑干与脊髓分离时动物感觉不到痛的刺激,只破坏脊髓,体内脏器完整无损,适于采样时使用。
    缺点:施力不当,特别是施力不够时,动物不能立即死亡,会造成动物疼痛以及肺、脾、肾等脏器充血和淤血。
    三、击打头盖骨法
    主要用于豚鼠、兔等啮齿类动物。方法是用木锤等硬物重击动物头部使大脑中枢遭到破坏,动物痉挛并死亡。
    优点:简单易行,操作得当能使动物痛觉立即全部消失。
    缺点:操作不当仅会造成动物部分痛觉丧失;会引起脑损伤痉挛、鼻出血、颈部气管或肺内出血、个别内脏破裂等。
    四、断头法
    主要用于大、小鼠等小型啮齿类动物。方法是用右手握住大鼠头部,左手握住背部,露出颈部,助手用剪刀在动物颈部垂直将头剪断,动物脑与脊髓断离且大量出血而死亡。
    优点:使动物立即丧失眨眼反射,对组织和血液的生理学(酶)变化影响最小。
    缺点:操作不当仅会造成动物部分痛觉丧失;血液可灌入气管及肺组织,影响肺重及组织学镜检,有时可损伤甲状腺。
    五、空气栓塞法
    常用于犬、猫、兔、豚鼠。向动物静脉内注入一定量的空气,可在右心随着心脏的跳动与血液相混使血液成泡沫状,并随血液循环到全身。进入肺动脉,可梗阻其分支,进入心脏冠状动脉,可造成冠状动脉阻塞,发生严重的血液循环障碍,动物很快死亡。一般兔、猫等由静脉注入20~40ml,犬由前肢或后肢皮下静脉注入80~150ml。
    优点:操作简便。
    缺点:会造成动物抽搐、角弓反张,发出痛苦呻吟;只能用于深度麻醉的动物,不能单独使用。
    六、过量注射麻醉剂法
    用于各种动物。可经静脉、腹腔、肌内、皮下和心内等途径注射大量的麻醉剂来达到迅速致死的目的,其中静脉注射最迅速有效。最常用的麻醉药是盐酸氯胺酮和水合氯醛。
    优点:价廉,作用迅速,动物无不适感。
    缺点:浓度过高有局部刺激性
    七、急性失血法
    大鼠和小鼠可采用眼眶动脉和静脉急性大量失血方法立即死亡。家兔可采用颈动脉急性大量失血方法立即死亡。犬可先轻度麻醉(每千克体重静脉注射硫喷妥钠20~30mg即快速入睡),暴露股三角区,用锋利的杀犬刀在股三角区做一个约10cm的横切口,把股动、静脉全切断,立即喷出血液,用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块,同时不断地用自来水冲洗流血,使切口处保持畅通,动物在3~5分钟内即可死亡。
    优点:对脏器无损伤,适用于活杀采集病理切片标本。
    缺点:需要受过培训、技术熟练的人员来操作,即便如此动物仍会受到很大的痛苦,仅适用于麻醉状态下的动物;易造成动物脏器贫血,影响脏器称重。
    八、开放性气胸致死法
    将动物开胸,使胸膜腔的压力与大气压力相等,肺脏受大气压缩发生肺萎陷,纵隔摆动,动物窒息而死。
    优点:操作方便。
    缺点:动物的痛觉不会立即消失;不能单独使用,要在动物麻醉状态下使用。
    九、化学致死法
    1、将动物装笼后放入透明塑料袋内,封好后慢慢充入二氧化碳,动物很快死亡。
    2、静脉内注入一定量的氯化钾溶液,使动物心肌失去收缩能力,心脏急性扩张,致心脏迟缓性停跳而死亡。家兔一般耳缘静脉注入5~10ml,犬一般前肢或后肢下静脉注入20~30ml。
    3、静脉注入福尔马林溶液使血液内蛋白凝固,动物由于全身血液循环严重障碍和缺氧而死,犬一般注射20mL。
    优点:价廉,动物无不适感。
    缺点:注射的速度要快,剂量要大到足以使动物的心博迅速停止;福尔马林毒性较大,实验人员要做好自身的防护;不能单独使用,要在动物深度麻醉后再使用。
    十、脑脊髓刺毁法
    主要用于蛙、蟾蜍等两栖动物和爬行动物。具体的方法是用左手的拇指压住蛙头,右手持金属探针由头前端沿线向尾方刺触,触及凹陷处(枕骨大孔),将探针由凹陷处垂直刺入,再转向头侧,向前探入颅腔,然后向各方搅动,捣毁脑组织。脑组织捣毁后将探针退出,再由枕骨大孔剌入,并转向尾侧,与脊柱平行刺入椎管破坏脊髓。动物若四肢肌肉完全松弛,则脑和脊髓被完全破坏。
    优点:操作得当能使动物立即丧失全部痛觉。
    缺点:需要专业培训,了解蛙的骨骼结构;操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验人员眼内,如被射入,立即用生理盐水冲洗眼睛。

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